自拍偷在线精品自拍偷无码专区,国产成人A亚洲精V品无码,FREE性玩弄妇女HD,公交车扒开稚嫩挺进去J

免費(fèi)咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > 碧云天 LipoInsect轉(zhuǎn)染試劑(C0551-7.5ml)現(xiàn)貨供應(yīng)

碧云天 LipoInsect轉(zhuǎn)染試劑(C0551-7.5ml)現(xiàn)貨供應(yīng)

 更新時(shí)間:2024-04-19 點(diǎn)擊量:591

產(chǎn)品名稱:碧云天LipoInsect轉(zhuǎn)染試劑(C0551-7.5ml)現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品貨號(hào):C0551

產(chǎn)品品牌:碧云天

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

碧云天LipoInsect轉(zhuǎn)染試劑是一種基于陽離子脂質(zhì)體等最新轉(zhuǎn)染技術(shù)的非常高效的新型昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑。本產(chǎn)品轉(zhuǎn)染效率高、操作簡(jiǎn)單、細(xì)胞毒性低、重復(fù)性好,達(dá)到了國(guó)際最主流昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效果。
本產(chǎn)品適用于將pFastBac1等桿狀病毒表達(dá)載體質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染到Sf9、Sf21和High Five™等昆蟲細(xì)胞以用于Bac-to-Bac®、BaculoDirect™和InsectSelect™表達(dá)系統(tǒng)的蛋白表達(dá)。
Bacmid轉(zhuǎn)染:
1. 昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)(以六孔板為例,其它培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿可參考六孔板):按照每孔約80萬Sf9或Sf21細(xì)胞(具體的細(xì)胞數(shù)量據(jù)細(xì)胞類型、大小和細(xì)胞生長(zhǎng)速度等而定)用正常的細(xì)胞培養(yǎng)液接種到六孔板內(nèi),使細(xì)胞密度能達(dá)到約70-90%。在27-28℃培養(yǎng),后續(xù)轉(zhuǎn)染和培養(yǎng)也在該溫度下進(jìn)行。
2. 15分鐘后,將正常的細(xì)胞培養(yǎng)液更換為平板培養(yǎng)液(含1.5%胎牛血清不含抗生素的SFX-INSECT培養(yǎng)液)每孔0.8ml。

3. 對(duì)于待轉(zhuǎn)染的六孔板中每一個(gè)孔的細(xì)胞,取兩個(gè)潔凈無菌離心管,分別加入100μl不含血清和抗生素的SFX-INSECT昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)液用于稀釋bacmid和轉(zhuǎn)染試劑。其中一管加入16μg bacmid,并用槍輕輕吹打混勻;另一管加入8μl LipoInsect™轉(zhuǎn)染試劑,用槍輕輕吹打混勻,或者輕微Vortex混勻,但不可離心。稀釋的bacmid和轉(zhuǎn)染試劑室溫靜置約2-5min(最多不得超過30分鐘)。隨即把稀釋的bacmid用移液器輕輕加入到稀釋的LipoInsect™轉(zhuǎn)染試劑中,輕輕顛倒離心管或者用槍輕輕吹打混勻,室溫靜置15-30分鐘。

4. 按照六孔板每孔200μl LipoInsect™轉(zhuǎn)染試劑-bacmid混合物的用量,均勻滴加到整個(gè)孔內(nèi),隨后輕輕混勻。
5. 為達(dá)到最高的轉(zhuǎn)染效率,細(xì)胞在轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)3-5小時(shí)后宜更換為新鮮的wan全培養(yǎng)液(對(duì)于Sf9細(xì)胞,推薦在轉(zhuǎn)染4小時(shí)后更換培養(yǎng)液)。
6. 繼續(xù)在27-28℃培養(yǎng)約96小時(shí)后,收集每孔的培養(yǎng)液,500g離心5分鐘,獲得的上清即為P1代桿狀病毒(病毒滴度通常為1×106~1×107 pfu/ml)。P1代病毒4℃避光保存,如果包裝病毒時(shí)的細(xì)胞培養(yǎng)液為無血清培養(yǎng)液宜添加胎牛血清至終濃度為2%以保護(hù)病毒被蛋白酶降解。P1代病毒近期不使用的情況,可以適當(dāng)分裝后-80℃長(zhǎng)期保存。盡量避免反復(fù)凍融病毒,反復(fù)凍融可能導(dǎo)致病毒滴度下降10-100倍。
7. 為獲得更高滴度的桿狀病毒,可以使用P1代病毒感染Sf9或Sf21細(xì)胞等來獲得P2代桿狀病毒(病毒滴度通常為1×107 ~1×108
pfu/ml)。具體操作請(qǐng)參照昆蟲細(xì)胞Bac-to-Bac Baculovious expression system的相關(guān)操作規(guī)程。大致的步驟為使用P1代病毒感染2×106個(gè)貼壁約1小時(shí)的Sf9或Sf21細(xì)胞,推薦的病毒的MOI為0.05-0.1,過高的MOI會(huì)導(dǎo)致獲得的病毒質(zhì)量下降。27-28℃培養(yǎng)48小時(shí)后,同步驟f收集每孔的培養(yǎng)液,隨后500g離心5分鐘,獲得的上清即為P2代桿狀病毒。P2代病毒的保存條件同P1代。由于桿狀病毒在每一代的擴(kuò)增過程中均易出現(xiàn)缺少突變,因此推薦最多擴(kuò)增至P3代病毒。

產(chǎn)品選購(gòu):

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

C0551-7.5ml

LipoInsect轉(zhuǎn)染試劑

7.5 mL


北京百奧創(chuàng)新科技有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)碧云天LipoInsect轉(zhuǎn)染試劑(C0551-7.5ml),歡迎選購(gòu)!

碧云天 LipoInsect轉(zhuǎn)染試劑(C0551-7.5ml)現(xiàn)貨供應(yīng)

欧美精品九九99久久在免费线| 蜜桃AV人妻国产精品李丽| 国产色视频一区二区三区| 国产精品美女久久久久| 交换年轻夫妇HD中文字幕3D| 国产精品扒开腿做爽爽爽| 免费人妻精品一区二区三区| 亚洲av无码国产精品麻豆天美 | 特黄a级毛片免费视频| 成 人片 黄 色 大 片| 国产乱自产黄A片在线观看| 国产精品99久久久久久人四虎 | 精品AV无码国产一区二区| 中文字幕| 人与鲁专区VR| 无码精品国产av在线观看| 国产精品麻豆VA在线播放| 久久久久无码精品国产| 丰满少妇作爱视频免费观看| 中国男男自慰gay片免费观看| 国内精品久久久久伊人AV| 国产精品久久久久一区二区三区共| 亚洲精品在线观看| 欧美大成色WWW永久网站婷| 被主人在厨房用黄瓜调教| 中文字幕在线播放| 性乌克兰18videos少妇| 99久久久久99国产免费AV| 日本丰满少妇XXXX| 色综合久久88色综合天天| 国产精品久久久久久久久免费| 人善交ZZZZXXXXX另类| 西西里的美丽传说在线观看| 日本动漫在线| 国产欧美日韩丝袜高跟鞋| 他揉捏她两乳不停呻吟| 最近日本韩国高清免费观看| 我与岳干柴烈火| 处破学生毛都没长齐在线播放| 日本熟妇毛茸茸| 欧美成人a猛片在线播放|